FUNDAMENTO:
Las proteínas son compuestas de carbono, oxigeno hidrogeno y nitrógeno. La mayoría de ellas contienen además azufre, y algunos fósforos. Sus moléculas son de proporciones coloidales, todas son muy complejas molecularmente y tienen alto peso molecular. La molécula proteica esta compuesta de una combinación de aminoácidos por condensación. Las pro teosas, peptonas, péptidos y aminoácidos son derivados de las proteínas formados en síntesis e hidrólisis.
Hay ciertas reacciones coloreadas que dan las proteínas y dependen de los aminoácidos presentes en la molécula proteica. Todas dan la reacción de BIURET. Se basa en una reacción típica de los enlaces peptídicos, en la cual los átomos de cobre del reactivo se unen a los grupos amino, lo que provoca una coloración rosa - violácea. Las que contienen tirosina dan las reacciones Xantoproteica.
Observaremos también en esta práctica como se destruye los enlaces que mantienen estable la conformación globular de las proteínas, de manera que éstas queden con una estructura filamentosa; con lo cual pierden su solubilidad y precipitan en forma de coágulos. La desnaturalización se efectuará sometiendo una disolución de proteínas a cambios de pH, a alteraciones de concentración del medio y a variaciones de la temperatura.
OBJETIVO:
Ver la presencia de proteínas y su importancia dentro de los organismos vivos y su mecanismo de acción a nivel molecular.
MATERIAL NECESARIO:
- Disolución de albúmina.
- Leche.
- Disolución de clara de huevo.
- Ácido clorhídrico.
- Ácido nítrico.
- Hidróxido sódico.
- Cloruro sódico.
- Sulfato de cobre.
- 12 tubos de ensayo.
- Un vaso de precipitado.
- Mechero Bunsen.
- Trípode y rejilla.
TÉCNICA:
Desnaturalización:
1. Hacer series de cuatro tubos con 2 ml de disolución de albúmina y numerar los tubos. Hacer lo mismo con la leche y la solución de clara de huevo.
2. Añadir a los tubos número 1, dos ml de ácido clorhídrico; a los número 2, dos ml de disolución saturada de cloruro de sodio; a los número 3, dos ml de solución de hidróxido sódico; y calentar suavemente a los número 4, sin añadir nada.
3. Anotar los resultados para cada serie de tubos.
Prueba de Biuret:
1. Preparar tres tubos de ensayo y colocar en cada uno 2ml de las disolucines proteicas.
2. Añadir en cada tubo 2ml de disolución de hidróxido sódico. Agitar y dejar caer cuatro o cinco gotas de una solución al 1% de sulfato de cobre.
3. Anotar los resultados.
Prueba Xantoproteica:
1. Preparar dos tubos de ensayo y verter en cada uno 2ml de las disoluciones proteicas.
2. Añadir 2ml de ácido nítrico en cada tubo. Anotar la coloración.
3. Calentar al baño María los tubos en un vaso de precipitado y volver a anotar los resultados.
CUESTIONES:
- ¿Qué le ocurre al calentar las proteínas con un ácido?
- ¿Qué coloración da la reacción de Biuret? ¿A qué se debe esta reacción?
- Una proteína desnaturalizada ¿podrá dar la reacción de Biuret? Razona la respuesta.
- ¿Qué son las proteínas?
- Pon el nombre de cinco proteínas indicando su importancia biológica.
Referencias bibliográficas:
- Manual de laboratorio del curso de Auxiliar de laboratorio y control de calidad del centro de Formación Ocupacional de Don Benito.
Autor: Fátima Lozano Chico
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